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圆二色光谱仪

录入时间:2019-12-09 15:48:00     点击:



仪器设备名称 型号 图片 厂家 功能简介 所在实验室 管理人员 联系方式 操作规程
圆二色光谱仪 Chirascan 应用光物理 1.广泛应用于手性化合物构型构象分析2.天然化合物、糖分子、聚物材料、生物大分子(如蛋白质、核酸、DNA、多肽等)的结构分析、相互作用研究 弘景楼1号楼504 周勤梅 13541241483

Chirascan 圆二色光谱仪操作规程

1.   开通氮气和仪器

1.1打开氮气压力阀,检查氮气钢瓶及氮气压力表是否正常,设定氮气的输出压力为约0.4Mpa

1.2开启仪器的电源:按Lamp开关(左侧黑色按钮),此时氙灯未被点亮;

System开关(右侧黑色按钮),仪器自检后Status指示灯渐渐变为稳定的绿色(说明:Rx Tx为红色指示灯,当操作软件运行后会正常闪烁)

1.3开启电脑,点击电脑桌面的ANMSNitrogen软件图标,弹出吹扫氮气软件。如果显示未连接,则选择左上角处的COM3连接。点击N2 on only注,通氮气至少约20分钟后点亮氙灯光源。

2.   开启操作软件

2.1双击Chirascan图标,主界面弹出。单击主界面上方快捷栏中的Pro Data(放大镜)图标。

2.2设定当前工作目录或新建文件夹

3.   设置测量参数

3.1设定带宽Bandwidth,开机默认设置为1.0nm。当测量波长大于500nm时,需适当增加带宽,比如    1.5nm2nm等,单击set确认。

3.2选择光谱的测量范围(蛋白样品如180-260nm)及步进(0.5nm1nm等),单击set确认。

3.3.设置单个数据点的采样时间,默认Time-per-point0.5s

4.   实验测量步骤

4.1测量仪器背景,记录吸收零值(因此后面我们所说的紫外吸收值都是相对于空气背景的吸收)样品    仓空置,直接采集空气(氮气)的值,点击Background

4.2测量样品体系背景

4.3测量样品


5.   数据处理

将所有要处理的数据都拖入同一数据界面,图谱上方点击绿色的D按钮可弹出处理界面

5.1多次重复数据的求平均Average

首先平均溶剂数据,Buffer2次测量数据,全部选中后点Average,得到Average:0文件;再平均样品数据,Sample3次测量图谱,全部选中点Average,得到Average:1文件

5.2扣除体系背景(即Subtract Baseline

选中溶剂文件,如上步平均后的溶剂数据Average:0,点击Set Baseline;再选中样品数据,Average:1,点Subtract Baseline得到Subtracted:0文件

解除背景单击Unset Baseline,选中扣除溶剂后的样品文件Subtracted:0文件,点击Remove Others

5.3平滑处理Smooth

选中要平滑处理的文件,如Subtracted:0,点击Smooth,进入Smooth界面,左上角的Window选择平滑次数,如4:要满足数据曲线不失真,噪音水平在零值附近上下平衡,点OK,得到平滑后的文件Smooth(s):0(需保留)和平滑噪音信号Smooth(r):0(需去除)

5.4 点击左上方的保存图标,


6.   数据文件保存

测量得到的原始数据文件会自动保存,但是处理后的数据需要再次保存。

点击左上方的保存图标或者点击File选择Save as保存为不同文件类型或格式的文件,便于以后的调用或引用


7.   数据输出

测量数据可以输出为各种格式,如ASCIICSVTXT等。CSV的文档可用Excel软件打开。

如果图谱中只有一条曲线,那么另存为simple CSV;如果多条图线,必须另存为prodata CSV


8.   实验结束

实验结束后应严格清洗比色皿,依据样品性质用buffer,水,乙醇,甲醇以及稀酸(2M 硝酸)或浓硝酸清洗,最好用专门的复合表面活性剂在50-60度环境中浸泡清洗10-15min,如Hellma NEXIIIDecon 90 等,最后要用水洗掉这些活性剂

说明:检查比色皿是否干净,可装入水后测量180-260nm范围CD谱线,看看是否平整并接近零值

 

关机顺序:

水浴,电子控温器,等电源可以独立关闭。

但是仪器主机关机前,必须先通过Nitrogen软件,点击turn off lamp only,关灯后继续吹扫氮气约5分钟,等灯冷却后,再点击turn off lamp and N2,然后关闭氮气总阀门。Nitrogen软件永远不要点击右上角的X关闭,直接关电脑主机即可。

最后关闭灯的电源(Lamp)和电子控制系统(System)。


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